分类: 基因组测序

植物核酸的提取和纯化是分子生物学研究的基础技术,获得高质量的核酸是进行后期深入研究其各项性能指标及应用的前提。为使所得核酸纯度高、结构完整性好,在植物样品制备和提取过程中应根据不同的研究需要,采取不同的措施,尽量排除其他大分子成分(如多糖、蛋白质等)的干扰。本期,和大家共同分享一下植物样品制备方面的知识,以期能够对大家的科研有所帮助。

被子植物6大器官模式图

1.在与研究目的不冲突的前提下,尽量选取新鲜、幼嫩、生长状态良好的组织部位。植物组织越幼嫩新鲜所含的次生代谢产物就越少,随着植物组织的逐渐成熟,次生代谢产物的含量会逐渐增多,而次生代谢产物的存在会影响核酸的提取效果,次生代谢产物越多,核酸提取越困难,得率也越低。

2.如果植物组织表面污渍较多,在采集之前应迅速用预冷的纯净水或75%乙醇擦拭或冲洗干净,再用吸水纸吸干组织表面残留液体。

3.将处理好的组织样本混合均匀后保存于2 mL或更大体积的旋盖冻存管中或者用准备好的锡箔纸包裹组织。

4.迅速置于液氮中冷冻1h以上,然后转移至-80℃长期保存,干冰运输。

植物组织制备注意事项

1.勿用TRIZol直接浸泡植物组织,也不要使用RNAlater等保护液保存植物组织,因植物组织含细胞壁及次生壁,保护液不易渗透进组织内部,达不到保护效果。

2.不建议将植物组织磨成粉末寄送,尽量送完整的组织,因粉末状态的样品更易降解。

3.果实类样品核酸提取得率低,为提高核酸的产量,需要加大送样量,一般为普通组织送样量的3倍以上。

植物组织制备常见问题汇总

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