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核酸提取是各种分子生物学研究中的一项必要技术,核酸提取的主要步骤包括破碎样本与核酸释放、核酸分离与纯化、核酸沉淀和洗涤。在进行这些繁琐的提取步骤中,操作不谨慎,会出现核酸(DNA/RNA)浓度低、有杂质、核酸降解等问题,影响后续的实验进行。

1:离心柱法提取核酸流程图(图片来自于网络)

为了解决以上问题,百迈客生物开发了一种简单、快速和高效的动物核酸提取试剂盒。可以从动物组织、细胞、血浆样本中快速提取总DNA&RNA,适用于后续PCR、 DNA文库构建、体外翻译等各种分子实验。

Blood/Cell/Tissue DNA Kit
动物DNA提取试剂盒

该试剂盒使用硅胶柱纯化方式,含特殊的结合液/蛋白酶K,能迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶;可高效清除细胞代谢物、蛋白等杂质。可以从动物组织、细胞、全血样本中快速提取总DNA。

产品特点

改良配方:含特殊的结合液/蛋白酶K,能迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶;可高效清除细胞代谢物、蛋白等杂质。
特殊纯化:使用硅胶柱纯化方式,提取过程中无需进行耗时的醇类沉淀,并去除RNA、杂蛋白、脂类 及其他抑制性杂质。
适用样本丰富:适用各种血液、动物细胞、动物组织。
毒性小:提取过程中无需使用苯酚等有毒试剂。

结果展示

1.DNA浓度/纯度检测:提取不同动物组织中的DNA,然后检测DNA的浓度和吸光度。结论:Qubit测得的DNA浓度较高;且A260/A280值在1.8~2.5之间,表明提取的DNA纯度高。

表1:用Qubit检测DNA的浓度,以及用Nanodrop检测DNA260 nm的吸光度。

2.DNA完整性检测:提取50 mg不同组织中的DNA,然后凝胶电泳检测完整性。

结论:条带明亮清晰无拖尾现象,表明提取的血液、动物组织、细胞的DNA完整性好。

图1:将提取的DNA每孔上样300 ng,琼脂糖浓度为1%70 V电压,跑胶45 min。Lane 1:λ-Hind Ⅲ DNA Marker ;Lane 2:鸡血;Lane 3:人血;Lane 4:小鼠胃;Lane 5
大鼠肺;Lane 6:小鼠脾脏;Lane 7:小鼠肝脏;Lane 8MarkerLane 9:果蝇;Lane 10:东亚飞蝗;Lane 11:石斑鱼;Lane 12:白条地藤壶;Lane 13λ-Hind Ⅲ DNA Marker。

Biomarker Cell/Tissue Total RNA Isolation Kit

动物RNA提取试剂盒

该试剂盒中的裂解液RLT Plus能迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶的活性;且基因组清除柱能有效分离上清液并去除gDNA。提取的RNA纯度高、质量稳定。适用于从动物组织、细胞样本中快速提取总RNA。

产品特点

适用样本丰富:可快速提取动物组织、细胞、昆虫等样本总RNA。
高效基因组DNA柱清除技术:可有效清除电泳可见gDNA残留,提取的总RNA纯度高,没有基因组、蛋白和其它杂质的污染。
RNA纯度高:可用于RT-PCR、qPCR、普通转录组测序、全长转录组测序等下游实验。

结果展示

1.RNA浓度检测:Nanodrop检测A260/A280值在2.0左右,表明提取的RNA纯度高,且浓度高。同时Agilent 2100生物分析仪检测的RIN值接近10,表明RNA无降解,完整性好。
2.RNA完整性检测:通过凝胶电泳检测,发现28S和18S条带最明亮、清晰、条带边缘锐利,且28S条带的亮度大概是18S条带的两倍或者以上,表明提取的RNA的完整性好。

图4:将提取的RNA每孔上样200 ng,琼脂糖浓度为1%180V电压,跑胶20 min

Lane 1:250 bp DNA Marker Lane 2:小鼠/子宫;Lane 3:小鼠/肺;Lane 4:小鼠胃;Lane 5:小鼠/心脏;Lane 6:果蝇。

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