分类: 基因组测序

1.研究背景

异源多倍体芥菜(Brassica juncea L.)是芸薹属禹氏三角的重要组成部分,芸薹属包含多种菜用、油用和调味作物。芥菜在中国分部广泛,具有长达6000–7000年的栽培时间。菜用芥菜不同的品种中可观察到巨大的表型变异,根据食用的器官不同可分为叶型,茎型,根型等不同的变种。油用芥菜作为芸薹属三大食用油来源之一,主要分布在印度次大陆和中国西北地区。其在加拿大个澳大利亚作为油菜作物,同时在欧洲,中国和其它地区作为调味品作物。
大约在半个世纪前,科学家提出阿富汗及其毗邻地区是是芥菜的主要起源中心,而小亚细亚半岛,中国中西部和印度东部是次要的多样性中心。后续的一些研究提出,芥菜根源于几种基于细胞遗传学和生物化学证据的独立杂交。近期,通过油用芥菜的SSR研究分析表明,中国与印度分别是其多系起源于遗传多样性的中心。然而,还有一观点认为中国是芥菜的主要起源中心,这一观点被在中国的西北部发现了野生的芜菁和黑芥,中国芥菜品种的丰富性和具长期栽培历史的考古证据所支持的。在2016年,基于重测序技术的芸薹属作物A亚基因组的基因组学分析中发现了油用芥菜与菜用芥菜的单系起源。但是芥菜作物的系统发育进化史已有了数十年的争议。

2.材料选择

109份芥菜(来自中国,印度,澳大利亚和欧洲国家)自然群体,根据其农业上的用途,分为菜用芥菜和油用芥菜两个群。

3.研究策略

测序平台:illumina Hiseq 2000;
简化基因组测序(SLAF-seq);
开发100000 SLAF标签,利用170181 SNPs进行群体进化分析。

4.分析软件

BWA,GATK和SAMtools;
MEGA 5.2,ADMIXTURE,EIGENSOFT;
RAxML v8.2.4;PAML v4.0

5.研究结果
研究结果一:群体分层分析

1. 系统发育树构建
109份材料主要分为4个群,2个菜用芥菜群体和2个油用芥菜群体。来自中国的食用器官分别为叶(28份材料)和茎的材料(27份材料)构成了一个群体,称为Vegetable (Leaf/Stem);来源于中国的15个根型芥菜聚类成一个独立的群体,称为Vegetable (Root)。油用芥菜中来自澳大利亚(9份材料),中国(7份材料)和欧洲(6份材料)形成一个群体,成为Oil (A,C,E);来自印度的共计14份材料聚为一个群体,称为Oil (IN)。系统发育树如下图1。来自澳大利亚,中国西北部和欧洲国家的油用芥菜具有棕色或黄色的种子,而来自印度的油用芥菜的种子的颜色为浅棕色或深棕色。

图1 109份芥菜系统发育树

2. PCA主成分分析
利用主成分分析来评估遗传变异,分析结果显示主要分为4个群:Vegetable(Leaf/Stem),Vegetable (Root),Oil (IN)和Oil (A,C,E),该结果与系统发育树结果一致。

图2 109份芥菜的PCA主成分分析

3. 群体结构分析
群体结构分析结果显示分为4个祖先群。

图3 109份芥菜的群体结构分析(K=4)

研究结果二:芥菜不同群体分化时间的估算
研究中分析了菜用芥菜和油用芥菜的B亚基因组的SNP变异。研究结果显示多态性的SNP大于B亚基因组中固定的SNP,这种模式与A亚基因组相似,支持了芥菜的单系起源问题。
研究中还发现了Vegetable (Root)型最先分化,然后是Oil (A,C,E),最后是Oil (IN) 与Vegetable (Leaf/Stem)的分化,并计算分化时间,分别是:0.067 Mya,0.065 Mya和0.032 Mya

图4 芥菜不同群体的系统发育关系

研究结果三:芥菜起源地与驯化
研究中发现了Vegetable (Root)芥菜较早发生了分化,表明中国是芥菜的主要起源地和多样性中心;同时发现了油用芥菜聚类为了2个群体:Oil (A,C,E)和Oil (IN),Vegetable (Leaf/Stem)型在Oil (IN)型中发生了分化,其分别在中国和印度进行种植,但分化时间远远晚于tVegetable (Root)型和Oil (A,C,E)型。这些研究结果表明:Vegetable (Leaf/Stem)行和Oil (IN)型在驯化中新形成的。

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参考文献:
Jinghua Yang, Changtong Zhang, Ning Zhao,et al. Chinese Root-type Mustard Provides Phylogenomic Insights into the Evolution of the Multi-use Diversified Allopolyploid Brassica juncea[J]. Molecular Plant,2017.

基因组事业部 张学雯丨文案
李绪明 | 审核
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