一步法RT-qPCR试剂盒

Biomarker One Step SYBR Green RT-qPCR Kit

目录：RK02012

规格：250 RXN (20 μL/RXN)

运输方式：干冰运输。

保存方式：-20 ℃避光保存，本产品避免反复冻融。

百迈客推出的一步法RT-qPCR试剂盒（Biomarker One Step SYBR Green RT-qPCR Kit），实现在同一个管中，一步完成从反转录到定量PCR的全部反应。以RNA为模板，使用基因特异性引物，在BiomarkerScript II One Step Enzyme Mix作用下，高效合成第一链cDNA。再以cDNA为模板，在2×One Step SYBR Green RT-qPCR Buffer作用下，配合优化的缓冲体系（缓冲体系中添加了有效抑制非特异性PCR扩增的组分和提高扩增能力的促进因子），对高/低丰度的目的基因进行精准定量扩增，该试剂盒重复性好，可信度高。

图1：不同仪器所需ROX Reference Dye不同，请参考上述机型。

（以下RNA模板，均是用百迈客微量动物组织RNA提取试剂盒提取）

1.灵敏度检测：均以小鼠肝脏RNA为模板，设置不同的浓度梯效率可达99.1%，10 pg的RNA模板也完全可以扩增。

图2：以10 μg-10 pg小鼠肝脏总 RNA为模板，扩增 GAPDH基因。结果发现：线性范围可达7个数量级，灵敏度可达 10 pg测分析。

2.重复性检测：分别设置30个复孔，扩增相同的基因，发现扩增曲线的Ct值几乎一致。

图3：以100 ng小鼠肝脏总 RNA为模板，设置30个复孔，扩增β-actin基因，扩增重复率高。

3.物种多样性检测：分别以多种动、植物的RNA为模板，进行定量分析。发现所有的样本对应的目的完全片段，均成功扩增出来。

图4：物种多样性检测：分别以不同物种、不同浓度的RNA为模板，进行一步法RT-qPCR扩增。包括人肝癌（蓝色）；果蝇（绿色）；小鼠肠道（黑色）；番茄果（红色）；日本水稻（紫色）；辣椒（橙色）；石斑鱼（灰色）。