BiomarkerScript III RT Master Mix for qPCR (One-Step gDNA Remover)
目录:RK02013
规格:100 RXN (20 μL/RXN)
运输方式:干冰运输。
保存方式:-20 ℃避光保存,本产品避免反复冻融。
百迈客在BiomarkerScript II Reverse Transcriptase(目录号:RK02002)基础上,开发出来的一款高效、快捷的cDNA一链合成预混液–BiomarkerScript III RT Master Mix for qPCR (One-Step gDNA Remover)。试剂盒中含有的第三代逆转录酶,RNase H活性明显降低,增强了与模板RNA的亲和力;试剂盒中的gDNA Remover组分,可快速去除gDNA污染,且具有热敏性,在高温条件下会快速失活,从而保证了cDNA的完整性。
RNase H活性明显降低,增强了与模板RNA的亲和力,逆转录效率高于二代产品。
试剂盒中的gDNA Remover Mix,可高效去除RNA模板中残留的基因组 DNA污染,保证后续定量结果更加可靠。
10 pg~1 μg总RNA均可扩增;且保证第一链cDNA合成效率和成功率。
反应温度高达55 °C,适合具有复杂二级结构(或GC含量高)的RNA模板的逆转录。
均以小鼠肝脏RNA为模板,设置不同的浓度梯度:1 μg、100 ng、10 ng、1 ng、100 pg、10 pg进行反转,然后取相同体积的cDNA进行qPCR实验。发现:从10 pg~1 μg总RNA起始量均可反转成cDNA。
图1:将小鼠肝脏RNA梯度稀释 1μg、100ng、10ng、1ng、100pg、10pg进行反转,然后取相同体积的cDNA,进行qPCR实验。结论:从10 pg~1 μg总RNA起始量均可反转成cDNA。
分别加和不加gDNA Remover 处理样本,后续进行反转定量。
图2:取浓度为50 ng的DNA样本,分别加和不加gDNA Remover处理,后续进行反转定量。实验组:加gDNA Remover处理(蓝色);对照组:未加gDNA Remover处理(橘色)。结论:加入gDNA Remover的可有效清除gDNA污染。
图3:取不同浓度的DNA(10、100、200、500 ng),然后直接加gDNA Remover Mix,37 °C加热5 min,进行凝胶电泳。结论:试剂盒清除gDNA污染效果显著,0~500 ng的DNA均可以完全清除。