PCR试剂盒

Biomarker HS 2X HF Master Mix

目录: RK02006

规格: 50 RXN

浓度: 2X

该试剂盒包含 HiFi DNA聚合酶、dNTPs、反应缓冲Buffer、优化的MgCl₂溶液，该预混液中仅需加入DNA模板、引物和水即可进行扩增。该预混液主要针对多样性模板，对如动物、植物、cDNA等均有较好的扩增效率。

运输方式：干冰运输。

保存方式：-20 °C避光保存。

• 高保真性和优异的扩增性能

Biomarker HS DNA聚合酶是一种全新的类似Pyrococcus furiosus来源的突变酶，具有独特的结构，融合了持续合成增强结构域，提高了保真度和延伸速度。保真度比Pyrococcus furiosus DNA聚合酶高6倍。

• 样本兼容性强，适合动物、植物、质粒等样本

优化的缓冲体系，适用于人、鸡、昆虫、质粒、玉米、水稻、番茄、拟南芥等样本。

图1：使用Biomarker HS DNA聚合酶，分别以人、鸡、小鼠、昆虫、质粒、玉米、水稻、番茄的全基因组DNA为模板，扩增长度分别为628 bp、 2.5 kb、1750 bp、750 bp、549 bp、300 bp、1.5 kb、1.2 kb的目标片段。所有片段均可以实现高特异性、高产量扩增。M：250 bp DNA Marker。

• 适用于不同GC%含量片段的扩增

图2：使用Biomarker HS DNA聚合酶，对不同GC含量（35%~65%）片段都可实现高质量的扩增。M：250 bp DNA Marker。

• 灵敏度高，可扩增低至10 pg的模板

图3：使用Biomarker HS DNA聚合酶，以不同模板量（10 pg、100 pg、1 ng、10 ng、500 ng）人基因组DNA为模板，扩增 628 bp的目的片段，发现不同模板量都可有效扩增。M：250 bp DNA Marker。

• 特异性强，可扩增10 kb以上的目的片段

Biomarker HS DNA聚合酶添加了能够抑制酶活性的单克隆抗体，可进行高特异性的热启动PCR。

图4：使用Biomarker HS DNA聚合酶，以不同基因组DNA为模板，扩增长度分别为549 bp、628 bp、1750 bp、2.5 kb、 5 kb、10 kb、13 kb的目的片段。所有片段均可以实现高特异性、高产量扩增。M：λ-Hind Ⅲ DNA Marker。

1.常规PCR（包含动物，植物等多种模板）

2.菌落PCR（直接菌落PCR，没有任何抑制作用）

3.长片段扩增（人基因组最长可达到23kb）

4.16S rDNA鉴定

5.cDNA（条带单一，50 ng Total RNA投入量获得的cDNA即可作为模板）

Q1：逆转录后的产物cDNA作为模板，每次加多少体积？

A1：如果DNA模板是从cDNA合成反应中获得的，则添加的体积应小于总反应体积的10%。若扩增长片段，可适当增加模板投入量。

Q2：扩增完的产物是平末端还是黏性末端？

A2：高保真酶扩增完的都是平末端产物。

Q3：出现非特异性扩增，要如何改善？

A3：1) 引物：引物自身形成二聚体，或者引物与靶序列有非特异性互补。建议重新优化设计引物；

2) 模板：模板量过高或者降解，使用量建议参考说明书。以及模板被污染，建议凝胶电泳检测模板纯度以及完整性。

3) 反应程序不够优化：若杂带比目的条带小，可提高退火温度，降低循环数；若杂带比目的条带大，可缩短延伸时间、降低循环数。