反转试剂盒

BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

 产品信息

Biomarker Script Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

目录: RK02002

规格: 100 RXN

 产品介绍

BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit是一款专门用于反转录实验的试剂盒,包含了BiomarkerScript II逆转录酶和两种逆转录的引物。

BiomarkerScript II逆转录酶是一种重组M-MuLV逆转录酶,拥有较低的RNase H活性同时兼具增强的热稳定性。与野生型M-MuLV相比,重组M-MuLV逆转录酶可以在更高的温度下合成第一链cDNA。该酶在高达48 ℃时仍具有活性,特异性和cDNA产量更高。

 运输与保存条件

运输方式:干冰运输。

保存方式:-80~-20℃避光保存。

 产品特点

  • 广泛的模板兼容性

可兼容不同物种,包括动物(小鼠、人、鸡、鸽子等)、植物(玉米、水稻、番茄等)样本。

  • 热稳定性

BiomarkerScript II逆转录酶是一种重组M-MuLV逆转录酶,拥有较低的RNaseH活性同时兼具增强的热稳定性。

图1:以1 μl人肝癌细胞RNA为模板,用BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit进行逆转录,得到cDNA产物。再以100 ng cDNA为模 板,用Biomarker HS 2× HF Master Mix进行PCR扩增,将得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳.

结果所示:扩增条带单一且产量高。

  • 高反转录酶的活性

该酶在高达48 ℃时仍具有活性,而且特异性和cDNA产量更高。较高温度下进行反转录,

能够减少RNA的二级结构,增加反转录的效率。

  • 扩增更长cDNA

BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit可扩增长达10 kb的cDNA,用于基因克隆。

 产品组分

V = A, G or C;N = A, G, C or T **Contains 1 mM dNTP. 注:将所有试剂储存在-20 ℃。

 产品应用

1.cDNA第一链的合成。

2.反转产物适用于qPCR实验。

3.反转产物适用于基因克隆。

4.cDNA文库构建。

 分子试剂+测序应用场景 

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FAQ

Q1:cDNA产量低?

A1: 1)模板RNA降解,或者浓度过低。通过变性琼脂糖凝胶电泳检查RNA的完整性。

2)小分子化合物污染RNA模板。可以乙醇沉淀,然后70%乙醇洗涤可以除去大多数污染物,例如EDTA和胍类;用氯化锂沉淀可以去除多糖。

3)蛋白污染RNA模板。苯酚/氯仿提取和乙醇提取可以去除蛋白污染,如蛋白酶。一些靶RNA可能包含RT的强终止序列。

4)建议使用随机引物而不是d(T)23VN。

Q2:mRNA可以用于逆转录反应吗?

A2: 总RNA或mRNA都可用于逆转录反应,通常总RNA足以进行大多数RT-PCR分析。